摘要：高效液相色譜近年來以其絕對優勢廣泛用于生物堿的分離和鑒定，尤其是由非極性固定想和極性流動相組成的反液相色譜系統(RP-HPLc)的應用約占90%，非極性固定相主要是以硅膠為基質的硅烷化反相鍵和相。本文研究并確定了高效液相色譜測定甾體類生物堿及其苷元茄胺的分析條件：紫外檢測波長210hm。流動相選擇乙腈：水為55：45(水相pH用磷酸調節至2.7)，進行紫外、紅外、質譜分析，證實其為龍葵甾體類生物堿的苷元茄胺。

　　本文選自：《天津藥學》雜志創刊于1989年春，由天津市醫藥集團有限公司(原天津市醫藥管理局)主管，天津市醫藥集團技術發展有限公司和天津市藥學會主辦，《天津藥學》編輯部編輯出版的藥學領域綜合性刊物。《天津藥學》雜志為雙月刊，每雙月末出版。國內外公開發行。語 言：中文，主管單位：天津市醫藥集團有限公司，主辦單位：天津市醫藥集團有限公司 、 天津市藥學會，創刊時間：1989年，出版周期：雙月刊，國內刊號：CN12-1230/R，國際刊號：ISSN1006-5687，郵發代號：6-175，復合影響因子： 0.402，綜合影響因子： 0.296

　　1 材料與方法

　　1.1 實驗儀器與材料

　　PHS-3C精密pH計(北京精密儀器有限公司);DZF-6050型真空干燥箱(北京三博科技有限公司);SENCO R型旋轉蒸發器(北京生物創新技術有限公司);AY120電子天平(日本島津有限公司);高效液相色譜儀(日本島津有限公司);甲醇、乙醇、氯仿均為分析純。

　　1.2 超聲波輔助提取

　　稱取龍葵樣品，用v[Hcl]：v(乙醇)1：4溶液潤濕24h后，龍葵與乙醇按1g：lOmL加入乙醇，在常溫下采用超聲波提取兩次。過濾后合并濾液。濾液經減壓蒸餾后得到黃綠色固體。用0.5mol/L的HCl溶解甾體類生物堿粗提物后，用氯仿萃取三次，去氯仿層，水相用NaOH溶液調節至pH為1O.5，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干后用甲醇溶解并定容至50mL，得到龍葵生物總堿的甲醇溶液。

　　1.3 茄胺的制備

　　將含生物總堿的甲醇溶液定量取出并減壓蒸干后，殘留物用40mLv[Hcl]：v(乙醇)1：1溶解，在100度下水解，水解后將溶液中乙醇蒸餾去除，余液用氯仿萃取三次，取酸水層。經NaOH溶液調節至pH為1O.5后，用氯仿萃取三次，合并氯仿萃取液，蒸干并用甲醇溶解，定容至50mL，得到茄胺的甲醇溶液。

　　1.4 色譜分析

　　經在紫外區全波段掃描確認標樣茄胺在210hm處有最大吸收峰，因此，選定210hm作為茄胺的檢測波長。色譜條件乙腈：水為55：45(水相pH用磷酸調節至2.7)，流速為1.2mL/min。茄胺進樣量20ug/mL-200 ug /mL時。進樣量2(ug/mL)與峰面積之間呈良好的線性關系。

　　2 結果

　　2.1 提取效果

　　超聲波輔助提取中草藥有效成份具有快速、簡易、提取效率高的特點。依據這個原則，本文選擇實驗條件溫度為：25度，乙醇濃度為95%。在最佳的實驗條件下，莖葉內的茄胺的平均得率為0.42%，果實內的茄胺平均得率3.22%。稱取3份龍葵果實樣品，進行平行提取實驗，計算茄胺產物的質量百分數以及同批樣品的RSD值，結果表明，3個龍葵樣品提出的茄胺平均質量分數為：2.53%，RSD值為：4.18%，證實提取工藝穩定、可靠。

　　2.2色譜效果

　　本文選擇水解1h的甾體類生物堿樣品作為考查對象，在未添加磷酸的條件下，色譜峰峰形嚴重拖尾，隨著酸度的加強，峰形開始銳化，至pH2.7時，甾體類生物堿和茄胺已完全離子化.峰形尖銳，兩類色譜峰分離度高。

　　3 討論

　　結合現代醫學的觀點和手段，在中草藥資源寶庫中、特別是從確有療效的中草藥中，尋找和開始具有我國自主知識產權的抗癌新藥不僅對促進人類的健康，而且對推進我國民族醫藥工業的發展和中藥現代化具有十分重要的意義。龍葵是一年生草本，全草含澳洲茄堿、澳洲茄明堿、澳洲茄邊堿等多種甾體類生物堿，它們的苷元主要為茄胺，生物堿含量以果實為最多，在未成熟的果實中含量最高，果實成熟后則消失。

　　龍葵含有豐富的藥用和保健價值成分，具有消炎、抗菌、降壓、抗癌等多種藥用功能，但到目前為止，龍葵的資源利用率仍然比較低，有關其活性成分研究的報導更是一片空白。上個世紀，有人采用國外提取茄屬植物的工藝，用薄層掃描色譜法測定了龍葵中茄堿的甙元茄胺的含量，發現龍葵果實中茄胺含量明顯高于全草含量，并在未成熟的青果實中發現茄胺含量甚至高達4.2%，但有關龍葵中總生物堿提取工藝及總含量的快速測定方法尚未見報道。在本文結果顯示中，超聲波輔助醇提法提取龍葵甾體類生物堿具有操作簡單、提取時間短的優點。同時其重復性好、穩定性與回收率高。