摘 要：應(yīng)用利血平拮抗模型，研究溫郁金石油醚部位抗抑郁藥效，通過強迫游泳等行為學(xué)指標(biāo)以及拮抗利血平實驗結(jié)果，評價溫郁金各濃度組抗抑郁作用，觀察不同濃度溫郁金石油醚部位對抑郁小鼠的抗抑郁作用。在強迫游泳實驗和懸尾實驗中，中、高濃度的溫郁金均能顯著減少小鼠的不動時間(P<0.05或P<0.01);在糖水偏好實驗中，溫郁金的中、高濃度顯著地增加糖水偏好值(P<0.01);在拮抗利血平實驗中，中、高濃度的溫郁金均能顯著地拮抗利血平所誘導(dǎo)的小鼠眼瞼下垂(P<0.01)和運動不能現(xiàn)象。結(jié)果表明：溫郁金石油醚提取物具有抗抑郁作用，實驗中，石油醚提取物劑量0.338g/kg為抗抑郁最佳劑量。

　　關(guān)鍵詞：溫郁金;利血平;抗抑郁，藥效學(xué)

　　在中醫(yī)理論認為抑郁癥屬于“郁證、不寐、臟躁”的范疇，其病理機制[1]為氣機失調(diào)，內(nèi)氣積滯，導(dǎo)致肝氣郁結(jié)，心神失養(yǎng)。溫郁金作為“浙八味”之一，在中醫(yī)配方[2]中應(yīng)用已逾千年，具有行氣解郁、清心涼血、利膽退黃的功效，用于疏肝理氣解郁為主要療效的中藥復(fù)方以及中藥，其抗抑郁作用已受到學(xué)者們的關(guān)注。

　　溫郁金于治療抑郁癥的復(fù)方中出現(xiàn)的頻率較高。趙錚蓉[3]等人等人溫郁金抗抑郁活性部位篩選的研究結(jié)果顯示，抗抑郁作用效果明顯，其中，石油醚和乙酸乙酯萃取后的部分效果顯著。為了深入探究藥效學(xué)關(guān)系，以溫郁金石油醚萃取物研究抗抑郁作用，為尋找、開發(fā)中藥抗抑郁新藥提供思路。

　　1 材料與儀器

　　1.1 材料與試劑

　　溫郁金，姜科植物溫郁金(Curcumawenyujin Y. H. Chen et C. Ling)的干燥塊根(寧波藥材公司)，懸尾箱(自制)，利血平(天津金耀藥業(yè)有限公司)，鹽酸氟西汀(蘇州中化藥品工業(yè)有限公司)，所有試劑均為國產(chǎn)分析純。

　　1.2 儀器與設(shè)備

　　旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(N-1100S 上海愛朗儀器有限公司);電子天平(奧豪斯儀器有限公司)等。

　　1.3 試驗動物

　　清潔級昆明(KM)小鼠，20±2g，雌雄各半，共108只，由長春醫(yī)學(xué)動物實驗研究中心提供。

　　2 方法與結(jié)果

　　溫郁金干燥塊根，用95%的乙醇回流提取(料液比為1∶10)，減壓回收乙醇后得到溫郁金乙醇提取物浸膏，以熱水溶解，石油醚多次萃取，合并萃取液，濃縮，浸膏得率為1.69%，以吐溫-80溶解備用，配制成按生藥量[3]計：10g/kg(低)，20g/kg(中)，40g/kg(高)三組濃度備用。取試驗小鼠，平衡飲食3d后，按性別體重隨機分為空白對照組、模型組、陽性對照組、溫郁金低、中、高濃度組，共六組，具體見表1。

　　分組后，對小鼠按照安排進行灌胃給藥，2次/d，按0.2mL/10g灌服，于每天上午8∶00，下午2∶00進行，連續(xù)14d。

　　2.1 強迫游泳實驗

　　末次給藥1h后，隨機取各組小鼠六只，置于水深10cm，恒溫(25±1℃)池中，從入水開始計時，進行6min的強迫游泳，觀察并記錄其后4min的不動時間，不動判定標(biāo)準(zhǔn)：小鼠不再主動掙扎、不扭動，結(jié)果見表2。

　　由表2可知，溫郁金中濃度組優(yōu)于低、高濃度組，其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組的小鼠強迫游泳的時間均明顯降低，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。與模型組相對比，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組小鼠強迫游泳時間均顯著的減少，實驗結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)。

　　2.2 懸尾實驗

　　常與強迫游泳實驗聯(lián)合，以“行為組學(xué)”形式[4]共同評價，各組隨機另取六只小鼠，末次給藥1h后，距尾尖部2cm處，將小鼠用膠帶系緊，倒掛在密閉的不透光箱子(20cm×20cm×30cm)中，其頭部距箱底約5cm，呈倒掛狀態(tài)，從懸掛開始計時6min，觀察并記錄其后4min的不動時間(以小鼠主動停止掙扎，懸掛不扭動判定為不動)，結(jié)果見表3。

　　由表3可知，溫郁金中濃度組優(yōu)于低、高濃度組，其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組，溫郁金石油醚提取物的各濃度組，陽性對照組的小鼠懸尾時間均顯著的減少，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)。與模型組相對比，溫郁金各濃度組，陽性對照組的小鼠懸尾時間均顯著的減少，具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.01)。

　　2.3 糖水偏好實驗

　　糖水偏好實驗[5-7]可以反映動物內(nèi)源性抑郁癥的中心癥狀，即快感缺失。首先于安靜環(huán)境內(nèi)訓(xùn)練小鼠適應(yīng)糖水性，在每籠中放置2個相同水瓶，首次一天內(nèi)，2瓶中均裝1%蔗糖水200mL;第2天，將另一瓶換成等重純水。

　　禁食禁水24h后，放置200mL的1%蔗糖水一瓶和等重純水一瓶，1h后，分別稱重2個水瓶，以糖水和純水的減失量計算糖水偏好指數(shù)，糖水偏好指數(shù)%=糖水消耗量/(糖水消耗量+純水消耗量)×100%[8]，結(jié)果見表4。

　　由表4可知，溫郁金高濃度組優(yōu)于中、低濃度組，其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組及模型組小鼠的糖水偏好指數(shù)均顯著的減少，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。與模型組相對比，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組及空白對照組小鼠糖水偏好指數(shù)均顯著增加，具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)。

　　2.4 拮抗利血平實驗

　　以眼瞼下垂、運動不能進行考察。眼瞼下垂觀測：各組取六只小鼠[9]，腹腔注射利血平1h后，將小鼠單個豎直垂放15s，觀測小鼠眼瞼下垂的程度，按照評分標(biāo)準(zhǔn)打分。

　　評分標(biāo)準(zhǔn)[10]：眼瞼全部睜開為0分，3/4睜開為1分，1/2睜開為2分，1/4睜開為3分，不睜開為4分。運動不能觀測：取眼瞼下垂觀測后的小鼠[11]，放入直徑為7.5cm的圓圈內(nèi)，觀察并記錄15s內(nèi)出圈次數(shù)。試驗結(jié)果見表5。

　　由表5可知，溫郁金高濃度組優(yōu)于中、低濃度組，其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組及模型組小鼠眼瞼下垂評分均顯著升高，具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。與模型組相對比，溫郁金石油醚提取物中濃度組和高濃度組，陽性對照組及空白對照組小鼠眼瞼下垂評分均顯著降低，具有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比較，溫郁金石油醚提取物中、高濃度組可顯著提高小鼠出圈率，其中中濃度組抗抑郁效果最為顯著。

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