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[論文摘要]取一定大小的病變組織,用病理組織學(xué)方法制成病理切片〔通常將病變組織包埋在石蠟塊里,用切片機切成薄片,再用蘇木精-伊紅(H-E)染色〕,用顯微鏡進一步檢查病變。 病變的發(fā)生發(fā)展過程,最后作出病理診斷。文章發(fā)表在《腹腔鏡外科雜志》上,是主治醫(yī)師論文發(fā)表范文,供同行參考。
[論文關(guān)鍵詞]病理,固定液,甲醛,乙醇
在病理組織診斷中制片過程尤為重要,而在病理制片的過程中組織的固定更為關(guān)鍵,故而對于石蠟切片,組織的固定則是必不可少的重要步驟。在多年的臨床經(jīng)驗中,筆者對AF、AAF及甲醛一生理鹽水三種混合固定液的優(yōu)劣進行仔細分析、對比,從而認為混合固定液與其他固定劑固定效果相比之下較為優(yōu)越。
由于病理學(xué)診斷是診斷的金標準,是輔助臨床診斷的主要把關(guān)口,也是最后的宣判性診斷。做好病理診斷,層層步驟就顯得尤為重要,包括組織的取材,固定,脫水,浸蠟,包埋及染色。組織的固定是一個關(guān)鍵的過程,因為沒有好的固定就沒有好的制片,沒有好的制片就不會有好的成品,一張好的切片與固定有著密切的關(guān)系。
1 固定的目的
固定的概念是將采取的活體組織置于化學(xué)性溶媒(固定液)中,使其不發(fā)生自溶與腐敗,保持被采取時的形態(tài)。
固定的目的是在于盡量使組織和細胞保持與生活時相仿的成分和形態(tài),迅速防止組織、細胞的死后變化,防止自溶與腐敗,使細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等各種成分轉(zhuǎn)變成不溶性物質(zhì),使組織中的各種物質(zhì)沉淀和凝固起來,而產(chǎn)生不同的折射率,造成光學(xué)上的差異,以便染色后易于鑒別和觀察。因此,固定的組織愈新鮮愈好,固定組織時,應(yīng)使用足量的固定液。其固定液的量一般小于組織塊總體積的4倍以上。
2 固定液的選擇
固定液必需要有較強的滲透能力,能迅速地滲入組織內(nèi)部,不會使組織過度收縮或膨脹,并且能使組織內(nèi)易觀察的成分可以凝固為不溶性物質(zhì),能使組織達到一定的硬度,獲得較佳的折光率和對染料具有較強的親和力。組織細胞中不至于因固定引起人為的改變,因為在凝固原生質(zhì)以后,增加了細胞對于各種穿透的抵抗力,不至于因以后的處理而使固定后的原生質(zhì)變形,并盡可能地避免使組織膨脹或收縮,使細胞內(nèi)的成分(蛋白質(zhì))凝固沉淀下來,由正常的半液體狀(膠體)變?yōu)榘牍腆w狀(凝膠),增加媒染作用和染色能力,使組織能夠得到充分的固定,便于以后的蠟塊保存。
固定液的種類很多,分為單純固定液和混合固定液,其中混合固定液比較常用。
常用單純固定液。甲醛(formaldehyde)為非沉淀性固定劑,是一種約有40%重量溶于水的氣體,易揮發(fā),市售的為40%的甲醛水溶液,也稱為福爾馬林液(formalin)。此液久存自行分解,形成白色沉淀為副醛(三聚甲醛或多聚甲醛)。用于組織固定的濃度為10%,實際濃度含甲醛為4%。其固定液滲透能力很強,固定均勻,對組織收縮小,故而對于免疫組織化學(xué)標本的制作常用此液。
3 小結(jié)
由于醇類對低分子蛋白質(zhì)、多肽及胞質(zhì)內(nèi)蛋白質(zhì)的保存效果較差,解決的方法是與其他試劑混合使用,例如加冰醋酸、乙醇、氯仿、甲醛等。在病理檢驗中,現(xiàn)在很少單獨使用醛類、醇類等作為組織固定液,多數(shù)為混合固定液。根據(jù)以上比較,證明混合固定液為多種組織及細胞的良好固定液,且優(yōu)于單獨固定液及其他固定劑,根據(jù)不同組織的性質(zhì)及不同的工作狀態(tài),在臨床的實踐工作中可選用適宜的固定液。
醫(yī)學(xué)論文投稿須知:《腹腔鏡外科雜志》1996年11月創(chuàng)刊于原山東醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院,經(jīng)山東省新聞出版局批準,當時為內(nèi)部準印,內(nèi)部準印刊字(398號)。經(jīng)過幾年的試刊,該刊受到了廣大腹腔鏡醫(yī)務(wù)工作者的好評,于 2000年9月在原山東醫(yī)科大學(xué)領(lǐng)導(dǎo)的大力支持下,經(jīng)國家新聞出版署和科技部批準(批準文號2000第310號),為教育部主管,山東大學(xué)主辦的國內(nèi)外公開發(fā)行的學(xué)術(shù)期刊。