摘 要：該實驗通過對小鼠進行通便功能實驗，研究了紅棗枸杞浸泡酒的潤腸通便作用。將小鼠隨機分為7組，采用洛哌丁胺灌胃建 立小鼠便秘模型，通過測定小腸推進率、首次排黑便時間、排黑便粒數以及排黑便質量，判斷紅棗枸杞浸泡酒對小鼠小腸運動和排便功能的影響。結果表明，該紅棗枸杞浸泡酒的高劑量組(10.0 mL/kg體質量)可提高小腸墨汁推進率;低劑量組(2.5 mL/kg體質量)可縮 短首粒黑便排出時間，低、高劑量組可增加5 h內排便粒數，高劑量組5 h內可增加排便質量。蒸餾酒組的四項實驗結果與模型組相比 均無顯著性差異，結合紅棗枸杞浸泡酒中功效成分分析，與蒸餾酒相比較，總黃酮、總酚及總糖含量均較高，進一步推測該浸泡酒的通便效果來自于浸泡過程中的功效成分。

　　關鍵詞：紅棗枸杞浸泡酒;便秘模型;潤腸通便

　　Abstract: The effect of red jujube and woltberry-soaked wine on the relaxing bowel was studied through mice' experiments. The mice were randomly divided into 7 groups, and the constipation model of mice was established by intragastric administration of loperamide. The effects of red juiube and wolfberry-soaked wine on intestinal motility and defecation function were determined by measuring the intestinal propulsion rate, the first time of black stool excretion, the number of black stool particles and the weight of black stool. The results showed that the high-dose group (10.0 ml/kg body mass) of the wine could improve the small intestinal propulsion rate; the low-dose group (2.5 ml/kg body mass) could shorten the first black stool discharge time; the low-dose and high-dose groups could increase the number of stool particles within 5 h, and the high-dose group could increase the stool weight within 5 h. There wasno significant difference in the four experimental results between the distilled liquor group and the model group, combined with the analysis of functional components in the wine, the contents of total flavonoids, total phenols and total sugar were higher than distilled liquor. It was further speculated that the defecation function came from the effective ingredients in the soaking process.

　　Key words: red jujube and wolfberry-soaked wine; constipation model; relaxing bowel

　　隨著人們飲食結構、生活方式和工作方式的改變，便秘已成為人們生活中的常見問題[1-5]。流行病研究發現，女 性慢性便秘病率高于男性[6]，且便秘的發生率隨年齡增加 而提高，特別是65歲以上便秘發生率明顯增高。我國成年 人患病率在7.0%～20.3%[7]。老年人慢性便秘總患病率為11.5%，其中年齡在60～65歲患病率為8.7%，而85歲以上的老人患病率則高達19.5%[8]。便秘是臨床常見的復雜癥 狀，現代很多人往往容易忽視便秘，但是便秘對人的身體健康有著很大的影響和損害[9]，便秘會導致人體內毒素積 累，降低五臟功能，甚至可能導致其他疾病的發生[10]。

　　紅棗含有蛋白質、糖類、有機酸、氨基酸、維生素A、維 生素C等豐富的營養成分[11]。紅棗不但是美味果品，還是滋補良藥，有強筋壯骨、補血行氣、滋頤潤顏之功效[12-14]。枸杞味甘、性平，富含枸杞多糖及甜菜堿等活性物質，是一種傳統的“藥食兼用”原材料，其活性成分可增強免疫力、抗腫 瘤、防衰老、增加造血功能、抗脂肪肝等[15]。

　　浸泡酒作為一種傳統的食品加工工藝，制作簡便，成 本低廉，一直以來得到廣泛的應用。信維平[16]從果蔬中分 離出抗氧化物質，可對飲料調味和作為預防癌癥等疾病的功能性食品。農仲文等[17]通過對山竹果皮中活性物質做浸 泡酒的研究，發現酒中活性成分高，抗氧化作用好。白酒是很好的浸提溶劑，可將紅棗、枸杞中的有效成分充分地 提取出來，并以適當的比例通過恰當的方式被人們攝入體內發揮其作用。以紅棗、枸杞為原料，蒸餾白酒為基酒制備浸泡酒，研究其潤腸通便的功效，為進一步開發具有潤腸通便功能的浸泡酒提供依據。

　　1材料與方法

　　1.1材料與試劑

　　紅棗、枸杞、濃香型蒸餾白酒(酒精度65%voD：市售;洛哌丁胺片(每片含洛哌丁胺2mg：西安楊森制藥公司;活性炭(粉狀)：天津市科密歐化學試劑有限公司;阿拉伯樹膠粉、低聚木糖：國藥集團化學試劑有限公司;植物總酚測試試劑盒(比色法)、總黃酮測試試劑盒(比色法)：南京建成生物工程研究所。

　　12儀器與設備

　　UV-2600紫外可見分光光度計：日本島津公司：5830R型離心機：德國Eppendorf公司。

　　13方法

　　13.1樣品處理方法

　　以紅棗、枸杞為原料，洗凈晾干，以料液比1：10(gmD)，用濃香型蒸餾白酒浸泡在陶罐中，加蓋密封后25 ℃避光貯存6個月，得到酒精度為60%vol的浸泡酒受試物。

　　13.2試劑配制方法

　　洛哌丁胺混懸液的配制：0小腸運動實驗：取洛哌丁胺片14 mg(7片)，用研缽研碎呈粉末后加蒸餾水至25 mL，臨用前配制。②排便實驗：取洛哌丁胺片26 mg(13片)，用研缽研碎呈粉末后加蒸餾水至25 mL，臨用前配制。

　　低聚木糖的配制：稱取15.00 g低聚木糖粉，用蒸餾水定容至100 mL

　　墨汁的配制：稱取阿拉伯樹膠10 g，加蒸餾水80mL，煮沸至溶液透明，稱取活性碳(粉狀)10g加至上述溶液中煮沸3次，待溶液涼后加水定容至100 mL，于冰箱中4℃保存，用前搖勻。

　　13.3受試物劑量確定方法

　　根據WOOD A M等[1關于灑精攝入風險閾值的研究表明，全因死亡率與飲酒攝入量呈現正相關性，其最低風險攝入量為100 g周(純酒精)。換算為酒精含量60%vol的浸泡酒，則每日攝入量為30mL。按照標準人體質量60kg換算為本次小鼠每日灌胃劑量為5.0 ml/kg體質量1，作為本次實驗的中劑量組。低劑量組灌胃劑量為2.5 mLkg體質量。

　　美國心臟協會、癌癥協會等組織建議的適度飲酒量為：女性每日酒精飲料攝入量不超過一份;男性每日酒精飲料攝入量不超過兩份(一份標準酒精飲料含有約17.7mL的純酒精)12，按照標準人體質量60 kg換算為酒精含量60%vol的浸泡酒，則男性每日攝入量為59 mL。換算為本次小鼠每日灌胃劑量為10.0 mlL/kg體質量，作為本次實驗的高劑量組。

　　根據《保健食品檢驗技術與評價規范》1，對于含乙醇的受試樣品，如果乙醇含量超過15%vol，允許將其含量降至15%vol。因此將浸泡酒及蒸餾酒的乙醇含量旋蒸降至15%vol，并調配至相應劑量。

　　1.3.4動物分組方法

　　選取無特定病原體(specific pathogen free，SP)級健康雄性BALB/c小鼠(18~22g)140只：由上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供，生產許可證編號：SCXK(P)20170005，動物質量合格證編號：2015000556762，在屏障設施檢疫室內預飼養5d后，按動物體質量將動物隨機分成小腸運動實驗組和排便實驗組，每個大組分成7個組，每組10只動物，即溶劑對照組(動物飲用水)，模型對照組(洛哌丁胺)，陽性對照組(低聚木糖1.5 gkg體質量)，浸泡灑低(2.5 mL/kg體質量)、中(5.0 mLkg體質量)、高(10.0 mLkg體質量)劑量組和蒸餾酒對照組(10.0 mLkg體質量)，灌胃劑量為0.1 mlL10 g，受試樣品、溶劑蒸餾水均經口灌胃，連續7d。

　　1.3.5實驗方法

　　(1)酒中功效成分的測定

　　糖含量測定：參照許亮2的方法進行測定：總酚含量、總黃酮含量的測定：試劑盒測試。

　　(2)小腸運動實驗

　　便秘模型的建立：給受試樣品7d后，各組小鼠禁食不禁水20h。模型對照組和3個劑量組灌胃給予鹽酸洛哌丁胺

　　5.2 mg/kg體質量，陰性對照組給等量蒸餾水。

　　墨汁推進率的測定：給鹽酸洛哌丁胺0.5 h后，劑量組灌胃給予含相應濃度受試樣品的墨汁(含10%活性碳粉、10%阿拉伯樹膠)，陰性和模型對照組給墨汁灌胃。

　　25 min后立即脫頸椎處死動物，打開腸腔分離腸系膜，剪取上端自幽門、下端至回盲部的腸管，置于托盤上，輕輕將小腸拉成直線，測量腸管長度為“小腸總長度"，從幽門至墨汁前沿為“墨汁推進長度”，并記錄數據。按下式計算墨汁推進率

　　該公式參照《保健食品檢驗技術與評價規范》潤腸通便功能評價方法"，將墨汁推進率按照該公式進行換算后才能更準確的反應各劑量組間的差異情況。墨汁推進率需進行數據轉換，x=Sin'Vp(X代表墨汁推進率的數據換算值，p為墨汁推進率，需用小數表示)。

　　(3)排便實驗

　　便秘模型的建立：給受試樣品7d后，各組小鼠禁食不禁水20h。模型對照組和3個劑量組灌胃給予鹽酸洛哌丁胺10.0 mg/kg體質量，陰性對照組給蒸餾水。

　　排便時間、糞便粒數和糞便質量的測定：給鹽酸洛哌丁胺0.5 h后，陰性對照組和模型對照組小鼠用墨汁灌胃，劑量組灌胃給予含相應濃度受試樣品的墨汁，動物均單籠飼養，正常飲水進食。從灌墨汁開始，記錄每只動物首粒排黑便時間、5h內排便粒數及質量，記錄時除去小鼠排出第一粒黑便前的糞便。

　　1.3.6數據處理及結果判定

　　試驗數據結果用SPSS 22.0軟件進行方差齊性檢驗，滿足方差齊要求的數據資料用單因素方差分析方法進行統計處理：對非正態或方差不齊的數據進行適當的變量轉換，待滿足正態或方差齊要求后，用轉換后的數據進行統計;若變量轉換后仍未達到正態或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統計。

　　2結果與分析

　　2.1紅棗枸杞酒與蒸餾酒中總黃酮、總酚、總糖、粗多糖含量的比較分析

　　紅棗枸杞酒和蒸餾酒中總黃酮、總酚、總糖、粗多糖含量的比較分析結果見表1。由表1可知，紅棗枸杞酒中總黃酮含量約為蒸餾酒的4倍，總酚含量約為蒸餾酒的90倍，總糖含量為3.74 g/100 mL，乙醇沉淀多糖含量為0.200 g/100 mL，說明浸泡酒中含有較多的單糖和小分子糖。蒸餾酒中的總糖含量為0.009 57 g100 mL，多糖未檢出，說明蒸餾酒中僅有少量的單糖和小分子糖存在。由于紅棗枸杞中的有效成分濃度較高，尤其是多糖含量較高，能促進腸道有益菌的增殖和所占比例，抑制腸道有害菌及腐敗物質形成，可促進益生菌產生短鏈脂和短鏈有機酸，可降低腸道pH，促進腸蠕動，改善便秘z，推測紅棗枸杞酒中的糖能夠起到促進腸胃消化、潤腸通便的作用。

　　2.2 小腸推進率

　　實驗期間，各組小鼠無死亡，生長情況良好，無腹瀉等 各種不良現象。由表2可知，模型對照組與空白組相比，小 腸推進率顯著降低(P<0.05)，說明建模成功;陽性對照組 與模型對照組相比，小腸推進率顯著增加(P<0.05)，說 明實驗體系可行;低、中劑量組、蒸餾酒對照組與模型對照組相比，小腸推進率無顯著性差異(P>0.05)，高劑量組 與模型對照組相比，小腸推進率顯著增加(P<0.05)。說明該 紅棗枸杞酒在高劑量濃度(10.0 mL/kg體質量)下可增加小 腸推進率。

　　2.3 首粒黑便排便時間

　　由表3可知，便秘模型對照組的首粒排黑便時間顯著高于空白組(P<0.05)，說明便秘模型成立;陽性對照組與模型對照組相比，顯著降低(P<0.05，說明實驗方案及實驗體系可行。低劑量組與模型對照組相比顯著降低(P<0.05)，且首粒黑便排便時間比陽性對照組少，說明該紅棗枸杞酒在低劑量濃度下可縮短首粒黑便排便時間。中劑量組、蒸餾酒對照組與模型對照組相比無顯著性差異(P>0.05)，高劑量組與模型對照組相比顯著增加(P<0.05)，在縮短首粒黑便排便時間方面效果不明顯。

　　2.4 5h內排黑便粒數

　　由表4可知，便秘模型對照組的5 h內平均排黑便粒數顯著低于空白組(P<0.05)，說明便秘模型成立;陽性對照組與模型對照組相比，顯著增加(P<0.05)，說明實驗方案 及實驗體系可行。低、高劑量組與模型對照組相比顯著增 加(P<0.05)，排便頻率明顯升高，且與陽性對照組相比效 果一致;中劑量組、蒸餾酒對照組與模型對照組相比無顯 著性差異(P>0.05)。說明該紅棗枸杞酒在低、高劑量濃度 下可增加5 h內排黑便的粒數。

　　2.5 5 h內排黑便質量

　　由表5可知，便秘模型對照組的5h內排黑便質量顯著低于空白組(P<0.05)，說明便秘模型成立;陽性對照組與模型對照組相比，排黑便質量顯著降低(P<0.05)，低、中劑量組、蒸餾酒對照組與模型對照組相比無顯著性差異(P>0.05)，高劑量組與模型對照組相比顯著增加(P<0.05)，且排黑便質量略低于陽性對照組。說明該紅棗枸杞酒在高劑量濃度(10.0mLkg體質量)下可增加5 h內排黑便的質量。

　　3結論

　　本實驗采用實驗性便秘模型小鼠評價了紅棗枸杞浸泡酒的通便功能。結果表明，紅棗枸杞酒在高劑量濃度下與便秘模型對照組均有顯著性差異(P<0.05)，而蒸餾酒對照組與便秘模型組無顯著性差異(P>0.05)，進一步證實通便效果來自于浸泡過程中紅棗與枸杞溶出的功效成分。結合紅棗枸杞浸泡酒的功效成分分析，紅棗枸杞酒中總酚及總黃酮相較蒸餾酒中含量較多，可影響小鼠的胃腸蠕動及排便功能。但是因實驗要求含酒精類的樣品需將酒精度縮至15%vol以下進行，因此需通過旋蒸手段將各劑量組酒精含量進行統一，推至一般人群的每日攝入量下能否表現出潤腸通便效果還需進一步探討，總之，枸杞紅棗浸泡酒與蒸餾酒對照組相比，其功效優勢更明顯。

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文章名稱： 紅棗枸杞浸泡酒對小鼠潤腸通便功能的研究

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