摘 要 考察 4 種活血化瘀類中藥注射液對血小板聚集作用的影響，探討血小板聚集作用在活血化瘀類中藥注射劑中的專屬性。選取 4 種具有代表性的活血化瘀類中藥注射劑，體外考察其對 ADP、PAF 和 THR 誘導的血小板聚集的抑制作用，找出普適性最好的誘導劑。紅花注射液對 3 種誘導劑誘導的血小板聚集均有抑制作用，且抑制作用最強，4 種注射液對 ADP 誘導的血小板聚集均有抑制作用。不同的活血化瘀類注射劑對不同誘導劑誘導的血小板聚集有不同的抑制作用，而 ADP 是一種普適性較好的誘導劑，可以廣泛的用在活血化瘀中藥注射液抑制血小板聚集活性的考察。

　　關鍵詞 活血化瘀; 中藥注射劑; 血小板聚集; 誘導劑

　　血小板聚集是血小板的主要功能之一。血小板在執行生理性止血作用的同時，也在病理性血栓形成過程中起著先導而關鍵的作用。因此，檢測藥物對血小板聚集功能的影響，對考察藥物是否有抑制血栓形成作用，以及闡明相關的活血化瘀機制等有重要意義。

　　由于活血化瘀類中藥注射劑臨床藥效較為明確，但其藥理作用復雜，很難用單一的模型來評價其藥理作用，為了更好的評價活血化瘀類中藥注射劑的作用，控制其質量，需要找到具有代表性的指標。大量文獻報道多數活血化瘀中藥都有抑制血小板聚集的作用，但報道較為模糊，為了進一步提高其說服力，文章從抑制血小板聚集的角度對4種活血化瘀類中藥注射劑進行再評價。血小板聚集的誘導劑有多種，但哪種誘導劑對活血化瘀類中藥注射劑的適用性最好，沒有相關報道，因此本文對3種不同的誘導劑進行考察，為今后誘導劑的選擇提供理論依據。

　　1材料與方法

　　1.1 材料

　　1.1.1 實驗動物 10周齡;體重：1.8~2.1 kg：數量：5只雄性：品系：日本大耳白家兔：級別：普通級;實驗動物生產許可證號：SCXK(京)2019-06;由北京隆安實驗動物養殖中心提供：實驗使用許可證號：SYXK(京)2015-0033，實驗地址為北京市藥品檢驗所。

　　1.1.2 試劑 二磷酸腺苷ADP(北京世帝科學儀器公司)，濃度：5 umol/L：凝血酶THR(中國藥品生物制品檢定所)，批號140605-200824：血小板活化因子PAF(ACROS)，批號：A0208208001：0.9%氯化鈉注射液(中國大冢制藥有限公司)，批號：0B72H2：枸檬酸納(北京化學試劑公司)，批號：20180904：滅菌注射用水(大同市惠達藥業有限責任公司)，批號：1907261.

　　丹參注射液(10 ml./支，20190623)：舒血寧注射液

　　(5mlL/支，2019/01/05);紅花注射液(10 mlL/支，20190325);血栓通注射液(5 ml./支，20190520)。

　　1.1.3 儀器 LG-PABER-1型血小板聚集凝血因子分析儀(北京世帝科學儀器公司)，DT5-離心機(北京時代北利離心機有限公司)，MEK-6318血液分析儀(北京健長醫療器械有限公司)。

　　1.2 方法

　　1.2.1 血漿制備 家兔采取頸總動脈放血75 mlL，加3.8%枸檬酸納(1：9)抗凝，1 000 r/min離心10 min制備富血小板血漿(PRP)，剩余血樣繼續3 500 r/min離心10 min制備貧血小板血漿(PPP)。用血液分析儀測定PPP和PRP中的血小板數，PPP中血小板數一般在5x10°個IL以下，利用PPP調節PRP中的血小板數在4.0 x10"～4.5 x 10"2個/L之間[，為保證測量的準確性，血小板聚集的測定應在4h內完成，且PRP不可冷凍保存和過度震蕩

　　1.2.2 血小板聚集測定 取PPP 210L加入測試杯，進行儀器調零。再取PRP 180 uL[64]，分別加入不同樣品液20 uL，37 ℃孵育180 s，分別加入聚集誘導劑10uL，測定5 min內的最大聚集率。

　　1.3統計方法

　　使用SPSS17.5統計軟件采用方差分析，對比各組之間的差異。

　　2實驗結果

　　分別測定丹參、紅花、舒血寧和血栓通注射液對3種不同誘導劑的血小板聚集最大聚集率，結果見表1-表3。

　　2.1 4種活血化瘀注射劑對ADP誘導的血小板聚集的影響

　　由表1可以看出丹參、紅花、舒血寧和血栓通注射液對ADP誘導的血小板聚集均有抑制作用，與空白組相比差異非常顯著(P<0.01)，其中紅花注射液的抑制作用最強，優于其它3種注射劑。

　　2.2 4種活血化瘀注射劑對PAF誘導的血小板聚集的影響

　　由表2可以看出紅花和舒血寧注射液對PAF誘導的血小板聚集具有較強的抑制作用，并與空白組相比具有顯著性差異(P<0.01)，丹參和血栓通注射液幾乎無抑制作用，與空白組相比無顯著性差異(P>0.05)，其中紅花注射液的抑制PAF誘導的血小板聚集的作用最強。

　　2.3 4種活血化瘀注射劑對THR誘導的血小板聚集的影響

　　由表3可以看出紅花注射液對THR誘導的血小板聚集具有較強的抑制作用，與空白組相比差異非常顯著(P<0.01)，丹參、舒血寧和血栓通射液無抑制制作，與空白組相比無顯著性差異(P>0.05)。

　　3 討論

　　由上述結果可以看出，4種活血化瘀注射液對不同誘導劑誘導的血小板聚集的抑制作用各不相同，紅花注射液對3種誘導劑均有抑制作用，丹參和血栓通注射液僅對ADP誘導的血小板聚集有抑制作用，舒血寧注射液對ADP和PAF誘導的血小板聚集有抑制作用。由于4種活血化瘀注射劑對ADP誘導的血小板聚集均有抑制作用，因此ADP作為血小板聚集的誘導劑的普適性較強，在今后研究活血化瘀類中藥注射劑抑制血小板聚集作用時，可以采用ADP作為誘導劑。

　　活血化瘀類中藥藥理作用廣泛，抑制血小板聚集是其發揮藥理作用的主要機制之一。并且大多數活血化瘀類中藥都具有抑制血小板聚集的作用，而不同活血化瘀類中藥抑制作用強度不同，以此可以考慮利用該指標去量化其藥理活性，從生物性的角度控制其質量，克服目前活血化瘀類中藥理化質量控制的不足，以保證活血化瘀類中藥臨床使用的安全有效。

　　測定血小板聚集實驗時，離心完的PRP與PPP血漿一定要用血液分析儀測定其血小板數，盡量保證每次實驗PRP血漿中的血小板數相同，若PRP中的血小板數過高，可以用PPP進行調節;過低時可降低離心的轉速。制備好的血漿最好在4h內完成測定，時間過長血漿的穩定性會下降，并且避免過度震蕩，過度震蕩也會使血漿的穩定性下降，避免冷藏，低溫會加速血小板聚集，以上操作均能導致測量結果有較大的誤差。

　　影響血小板聚集實驗的因素較多，為了保證每次試驗結果的準確性，應建立相應的標準操作規程，不同實驗室均應按照此操作規程進行試驗，使實驗結果具有可比性，加快該方法在不同實驗室的推廣應用。

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　　Abstract To study the effect of 4 blood circulation of traditional Chinese medicine injections on platelet aggregation, and to investigate the specificity of platelet aggregation on the blood circulation of TCM injections. Select 4 representative TCM injections of blood irculation, to examine the inhibition of platelet aggregation induced by ADP, PAF, and THR in vitro, and to find the best universal inducer. Saflower injection had inhibition on platelet aggregation by three inducer, and the inhibition was strongest, 4 injections had inhibition on platelet aggregation induced by ADP. Different blood circulation injection had different inhibitory effect of platelet aggregation induced by different inducers, ADP was a better universal inducer, could be widely used in investigated the activity of inhibition of platelet aggregation in traditional Chinese medicine injection

　　Key words Blood circulation, TCM injection, Platelet aggregation, Inducer

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文章名稱： 4種活血化瘀類中藥注射劑對血小板聚集功能的影響

文章地址： http://www.kg120.com/mianfeiwx/58978.html