生姜(Zingiber officinale Roscoe)是姜科姜屬的多年生草本植物,是世界上重要的調(diào)味品之一,亞洲、非洲、拉丁美洲等地均有種植。
1.材料
1.1 試驗材料
生姜、大豆卵磷脂、組氨酸、硫代巴比妥酸、三氯乙酸.
1.2 試驗儀器
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2.試驗步驟
2.1 生姜提取物的制備
鮮姜清洗去皮,用榨汁機(jī)打碎,粒度在2mm3以下,分別以2倍的水和60%乙醇作為提取劑進(jìn)行提取。提取條件按照提取溫度,提取液pH值,提取時間進(jìn)行優(yōu)化。提取液取出后3500r/min離心30min,取上層清液真空抽濾兩次,收集濾液,用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將所收集的濾液濃縮制得生姜提取物,備用。
2.2 生姜提取物溶液的配制:
采用無菌蒸餾水配制成不同濃度的生姜提取液。以上所有操作均在無菌條件下進(jìn)行,所用設(shè)備、工具經(jīng)75%的酒精棉球擦拭并紫外照射15min。
2.3 生姜提取條件的試驗設(shè)計
本試驗選取提取時間(A)、浸提液pH值(B)、提取溫度(C)作三因素三水平正交試驗。因素(見表2-1)。
表2-1 因素水平表
因素水平 |
A
提取時間(min) |
B
浸提液pH值 |
C
提取溫度(℃) |
1 |
30 |
4.0 |
30 |
2 |
50 |
6.0 |
40 |
3 |
70 |
8.0 |
50 |
2.4 生姜提取物的抗氧化試驗
取1g大豆卵磷脂溶于氯化鉀-組氨酸緩沖體系(pH6.8)中,均質(zhì),并用超聲波在4℃下超聲處理45min。取5mL的脂質(zhì)體,加入1mL生姜提取物。向二者的混合物中加入0.1mL 50 mM FeCl3和0.1mL 10mM 抗壞血酸鈉引發(fā)脂質(zhì)氧化,然后把樣品放在37°C 水浴中保溫1h,隨后測TBARS。
3.結(jié)果與分析
3.1 生姜提取液的比較研究
由圖3-1可以看出,水和60%乙醇的生姜提取液均具有較強(qiáng)的抗氧化能力,其中60% 乙醇的生姜提取物抗氧化效果更好,這可能是由于生姜中的抗氧化物質(zhì)在水中的溶解性較差。本實驗選取水和60%乙醇作為生姜的提取液,在同等條件下進(jìn)行比較研究,得出一種提取效果最好的提取液為60%乙醇。
3.2 60%乙醇對生姜浸提條件的優(yōu)化
A,B,C 三個因素中R值的大小,可以看出A>C>B,A因素,即提取時間為最重要因素,其次為C因素,即提取溫度,最后為B因素,即提取液pH值。3個因素的主次關(guān)系是:由主到次為ACB。
方差分析結(jié)果顯示,F(xiàn)C=46.500>F0.05(2,2)=19.00,F(xiàn)A=23.000>F0.052,2)=19.00說明C因素和A因素差異顯著。對于B因素,F(xiàn)0.05(2,2)=19.00>FB=2.50,說明B因素差異不顯著。60%乙醇提取生姜的最佳工藝條件為A1B3C2,即提取時間為30min、提取液pH為8.0、提取溫度40℃。以最佳組合參數(shù)為標(biāo)準(zhǔn),即提取時間為30min、提取液pH為8.0、提取溫度40℃,進(jìn)行三次驗證實驗,得到OD值的平均值為0.054。
3.3 生姜提取物的抗氧化試驗
各處理組在儲存期間TBARS值均有不同幅度的增加,但在第0d各處理組的TBARS值均顯著低于兩個對照組(p<0.05),說明各濃度的生姜提取物具有很好的抗氧化效果。儲存至第7、14、21d時,濃度為24%、32%處理組的TBARS值顯著低于蒸餾水對照組(p<0.05),這說明生姜醇提取物濃度越高抗氧化性效果越好。并且在第14、21d,濃度為16%、24%、32%三處理組之間的TBARS值差異顯著(p<0.05),這進(jìn)一步說明了隨生姜提取液濃度的增大其抗氧化能力也在增加。提取液濃度為24%和32%的處理組在第14、21d的TBARS值顯著低于對照組(p<0.05),且在第21d時它們的TBARS值分別為1.76和1.48mg/L。
結(jié)束語:
通過生姜提取條件的正交試驗得到生姜的最佳提取條件為,提取時間為30min、pH為8.0、溫度40℃,生姜提取物具有很強(qiáng)的抗氧化性。