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來源:期刊VIP網(wǎng)所屬分類:臨床醫(yī)學(xué)時間:瀏覽:次
摘要:低聚木糖又稱木寡糖,是由2-7個木糖分子以β-1,4糖苷鍵結(jié)合而成的功能性聚合糖。與通常人們所用的大豆低聚糖、低聚果糖、低聚異麥芽糖等相比具有獨特的優(yōu)勢,它可以選擇性地促進腸道雙歧桿菌的增殖活性。其雙歧因子功能是其它聚合糖類的10-20倍。文章發(fā)表在《中醫(yī)雜志》上,是中藥學(xué)畢業(yè)論文范文,供同行參考。
關(guān)鍵詞:低聚木糖,毒性試驗
用唾液、胃液、胰液和小腸酶液進行的消化實驗表明:各種消化液幾乎都不能分解低聚木糖,它的能量值幾乎為零,既不影響血糖濃度,也不增加血糖中胰島素水平,并且不會形成脂肪沉積,故可在低能量食品中發(fā)揮作用,最大限度地滿足了那些喜愛甜品而又擔心糖尿病和肥胖的人的要求,因此糖尿病人、肥胖病人和低血糖病人均可放心食用。
低聚木糖在低聚糖中占有重要的地位,首先它的有效服用量在眾多低聚糖中是非常低的,就雙岐桿菌增殖作用而言,它的有效攝入量為0.7g/人·日,為低聚異麥芽糖的1/20,低聚果糖的1/10,低聚半乳糖的1/7;低聚木糖在我國的研究開發(fā)是近幾年剛剛興起的[2],我們對其中一種具有潤腸通便作用的低聚木糖片進行了毒理學(xué)安全性評價。
結(jié)果表明該產(chǎn)品的小鼠急性毒性實驗為無毒物質(zhì),Ames實驗,小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核實驗,小鼠精子畸形實驗為無遺傳毒性作用,大鼠30天喂養(yǎng)試驗表明,各實驗組動物生長發(fā)育良好,各項指標均在本室正常值范圍內(nèi),與對照組之間差異均無顯著性,病理組織學(xué)檢查亦未見異常。說明該樣品對大鼠各項觀察指標未產(chǎn)生明顯毒性作用,食用該產(chǎn)品是安全可靠的。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 低聚木糖片 由某生物科技有限公司提供。
1.1.2 實驗動物 清潔級昆明種小鼠和清潔級Wistar大鼠由中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心提供,合格證號SCXK-(軍)2002-001。
1.1.3 Ames實驗菌株 由山東醫(yī)學(xué)科學(xué)院勞動衛(wèi)生與職業(yè)病研究所提供。
1.2 方法[1]
1.2.1 小鼠急性毒性試驗 選擇小鼠20只,雌雄各10只,體重為18~22g。劑量為10g/kg.bw,灌胃給予受試物,灌胃量為0.2ml/10g.bw。觀察14天,記錄動物中毒表現(xiàn)及死亡情況。
1.2.2 Ames試驗 試驗菌株為經(jīng)鑒定符合要求的鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型TA97、TA98、TA100、TA102,體外活化系統(tǒng)為多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的大鼠肝勻漿制備的S-9混合液。根據(jù)毒性測定結(jié)果,試驗設(shè)立200、500、1000、2500、5000μg/皿5個劑量,同時設(shè)立自發(fā)回變組、溶劑對照組和陽性對照組。試驗按照平板摻入法在加S-9與不加S-9混合液的條件下進行,每個組別設(shè)3個平皿。若受試物的回變菌落數(shù)為自發(fā)回變菌落數(shù)的2倍以上,并具有劑量—反應(yīng)關(guān)系則判定為陽性。整套試驗在相同條件下重復(fù)做兩次。
1.2.5 大鼠30天喂養(yǎng)試驗
1.2.5.1 試驗方法 選用體重60~80g斷乳大鼠80只,隨機分為4組,每組20只,雌雄各半。根據(jù)人體推薦量設(shè)立3個實驗組,受試物劑量分別為0.65、1.30、2.60g/kg.bw(分別相當人推薦量的25、50、100倍),將受試物按照動物體重的10%計算食物攝入量摻入飼料中給予實驗動物,即0.65%,1.30%,2.60% (質(zhì)量分數(shù))。對照組喂飼基礎(chǔ)飼料。單籠喂養(yǎng),自由飲食,每周稱重,記錄飼料加入量、剩余量,連續(xù)觀察30天。第30天禁食16h,第31天處死動物,取血進行血常規(guī)及血生化測定。
1.2.5.2 觀察指標 (1)動物的一般表現(xiàn)、體重、食物利用率。(2)血常規(guī)及生化指標:血紅蛋白、紅細胞計數(shù)、白細胞總數(shù)及其分類、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌酐、膽固醇、甘油三酯、血糖、總蛋白、白蛋白等。(3)病理解剖:臟器系數(shù)、大體觀察及病理組織檢查(肝、腎、脾、胃及十二指腸,睪丸或卵巢)。
2 結(jié)果
2.1 急性毒性試驗 灌胃給予受試物后,兩種性別的小鼠均未見明顯中毒癥狀,14天內(nèi)動物無死亡(見表1)。因此認為該受試物對兩種性別小鼠的急性毒性LD50均大于20g/kg.bw。根據(jù)急性毒性分級標準,該樣品屬無毒物質(zhì)。
2.2 遺傳毒性試驗
2.2.1 Ames試驗 由表1-1、表1-2可見,兩次試驗中受試物各劑量組回變菌落數(shù)均未超過自發(fā)回變菌落數(shù)的2倍,亦無劑量-反應(yīng)關(guān)系,說明在加與不加S-9時該樣品對鼠傷寒沙門氏菌TA97、TA98、TA100、TA102四株試驗菌株均未呈現(xiàn)遺傳毒性。
2.2.2 小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核試驗 由表2可見,受試物各劑量組微核率與陰性對照組之間差異無顯著性(P>0.05),而環(huán)磷酰胺陽性對照組與陰性對照組之間差異有非常顯著性(P<0.01),說明該樣品無致小鼠骨髓嗜多染紅細胞微核產(chǎn)生作用。
2.2.3 小鼠精子畸形試驗 由表3可見,受試物各劑量組小鼠精子畸形率與陰性對照組之間差異無顯著性(P>0.05),而環(huán)磷酰胺陽性對照組與陰性對照組之間差異有非常顯著性(P<0.01),說明該樣品無致小鼠精子畸形作用。
2.3 大鼠30天喂養(yǎng)試驗
2.3.1 動物的一般表現(xiàn)、體重、食物利用率 實驗中各實驗組動物均未出現(xiàn)拒食現(xiàn)象,生長活動正常,體重和食物利用率結(jié)果分別見表4和表5。從表中看出各實驗組動物體重與對照組之間無顯著性差異,各實驗組動物進食量、食物利用率與對照組之間差異亦無顯著性(P>0.05)。
2.3.2 血常規(guī)及生化指標 結(jié)果見表6、表7、表8-1、表8-2。從表中看出各實驗組的血紅蛋白、紅細胞總數(shù)、白細胞計數(shù)及其分類、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、尿素氮、肌酐、膽固醇、甘油三酯、血糖、總蛋白、白蛋白等指標均在正常范圍之內(nèi),與對照組之間差異均無顯著性(P>0.05)。
2.3.3 大體及組織學(xué)檢查 大體觀察各實驗組未發(fā)現(xiàn)異常,解剖時亦未發(fā)現(xiàn)膀胱、肝總管結(jié)石,臟器系數(shù)未見異常(見表9)。鏡下觀察對照組和高劑量組動物少數(shù)出現(xiàn)肝細胞和腎間質(zhì)細胞點狀壞死,灶內(nèi)有炎細胞浸潤,腎小管變性等,但病變程度較輕,且無組間特異性分布。脾、胃、十二指腸、睪丸或卵巢等均未見有意義的病理改變。
2.3.4 大鼠30天喂養(yǎng)試驗 在試驗期內(nèi)各實驗組動物生長發(fā)育良好,體重、食物利用率、血常規(guī)、血生化、臟器系數(shù)等各項指標均在本室正常值范圍內(nèi),與對照組之間均無顯著性差異。 病理組織學(xué)檢查亦未見異常,說明該樣品對大鼠各項觀察指標未產(chǎn)生明顯毒性作用。
3 討論
低聚木糖是低聚糖中有效服用量最小的糖類,具有低聚糖的所有優(yōu)良性質(zhì)。它們所具有的特殊生理功能正在日益引起人類的重視,其主要生理功能包括以下5個方面:(1)低甜度、低熱量;(2)難以被人體消化吸收,食用后基本上不增加血糖和血脂,但有潤腸通便的作用;(3)對人體大腸內(nèi)雙歧桿菌有明顯的增殖作用,抑制腸內(nèi)有害菌群的繁殖,降低腸道內(nèi)的毒性,提高機體免疫力;(4)不被口腔酶液分解,不被齲齒的鏈球菌作用,有防齲功能;(5)具有鈣、鐵吸收和間接調(diào)節(jié)血脂的功效[2]。
作為一種新型的保健食品,我們對其進行了安全性毒理學(xué)評價試驗,結(jié)果表明,該種低聚木糖片急性經(jīng)口毒性試驗中,雌雄小鼠LD50均大于20g/kg.bw,屬無毒物質(zhì),小鼠骨髓微核試驗、Ames試驗和小鼠精子畸形試驗結(jié)果為陰性,無致突變作用。大鼠30天喂養(yǎng)試驗期內(nèi),各實驗組動物生長發(fā)育良好,體重增重、食物利用率、臟器系數(shù)等各項指標均在本實驗室正常值范圍內(nèi),與對照組之間差異均無顯著性(P>0.05)。
實驗組血常規(guī)及血生化各指標均在正常范圍內(nèi)。大體觀察各實驗組動物的肝、腎、胃、腸、脾和卵巢/睪丸組織中,未見明顯異常。病理組織學(xué)檢查中,對照組和高劑量組少數(shù)動物的肝、腎標本出現(xiàn)病理改變,但這些病理改變程度較輕且無組間特異性分布,考慮與動物質(zhì)量有關(guān)。脾、胃、腸、卵巢、睪丸等臟器未見明顯異常。從目前情況下可以認為食用該產(chǎn)品是安全可靠的。
醫(yī)學(xué)職稱論文發(fā)表:《中醫(yī)雜志》是由中華中醫(yī)藥學(xué)會和中國中醫(yī)科學(xué)院聯(lián)合主辦的國家級中醫(yī)藥學(xué)術(shù)期刊。1955年創(chuàng)刊,月刊,是我國中醫(yī)藥界創(chuàng)刊最早的醫(yī)藥學(xué)術(shù)刊物之一,現(xiàn)月發(fā)行量近10萬冊,國內(nèi)外公開發(fā)行。2011年《中醫(yī)雜志》[1]將改為半月刊,每月2日和17日出版。
【參考文獻】
1 衛(wèi)生部衛(wèi)生法制與監(jiān)督司. 保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范.北京:中華人民共和國衛(wèi)生部,2003. 177-203.
2 袁建國,程顯好,侯永勤,等. 低聚木糖的研究開發(fā). 精細與專用化學(xué)品,2002,10,17-19.