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通過薄層色譜法、紫外分光光度法對羅布麻不同藥用部位有效成分的含量進行研究。研究羅布麻不同藥用部位有效成分的含量與藥用價值。
1 儀器與試藥
1.1 儀器 TU-1901紫外可見分光光度計(北京普析通用公司);LC-2010AHT高效液相色譜儀(日本島津);G硅膠(薄層層析用,青島海洋化工有限公司);1.2 試藥 1)羅布麻花;2)羅布麻莖;3)羅布麻根;S1)槲皮素對照品(中國藥品生物制品檢定所提供,批號:100081-200406);S2)山奈酚對照品(中國藥品生物制品檢定所提供,批號:110861-200808);4)羅布麻地上部分;5)羅布麻葉;6)羅布麻葉;7)羅布麻葉。上述樣品1-5、6、7分別于2009年8月10日、9月7日、10月9日自采于涉縣王金莊,由河北省邯鄲市藥品檢驗所孔增科主任藥師鑒定;甲醇、乙醇、乙醚均為分析純。
2 實驗方法與結果
2.1 紫外光譜鑒別 取各樣品粉末0.5g,分別加50%乙醇10ml,超聲20分鐘,濾過。取濾液2ml置100ml量瓶中,加50%乙醇稀釋至刻度,搖勻,取10ml置50ml量瓶中,加50%乙醇稀釋至刻度,搖勻(0.2mg/ml),以50%乙醇為空白,置紫外光區190-400nm掃描。結果見表1,圖1-5。
2.2 薄層色譜鑒別 取本品粉末0.5g,加80%甲醇50ml,加熱回流1小時,放冷,濾過,濾液蒸干,殘渣加水20ml使溶解,用乙醚振搖提取2次,每次20ml,棄去乙醚液,水液加鹽酸5ml,加熱回流1小時,取出,立即冷卻,用乙醚振搖提取2次,每次20ml,合并乙醚液,用水10ml洗滌,棄去水液,乙醚液用鋪有適量無水硫酸鈉的濾紙濾過,濾液揮干,殘渣加乙醇1ml使溶解,作為供試品溶液。另取槲皮素對照品、山奈素對照品,分別加乙醇制成每1ml各含0.5mg的溶液,作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗,吸取上述供試品溶液5μ1,對照品溶液各2μ1,分別點于同一硅膠G薄層板上,以正己烷-乙酸乙酯-甲酸(7:5:0.8)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以3%三氯化鋁乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照品色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點;置紫外光燈(365nm)下檢視,顯相同顏色的熒光斑點。結果見圖6。
2.3 含量測定 槲皮素:照中國藥典2005年版一部高效液相色譜法(附錄ⅥD)測定。結果見表2、圖7-9。
3 小結與討論綜合上述分析方法看出:3.1 羅布麻各藥用部位紫外吸收在204±2nm處有最大吸收;薄層色譜除羅布麻莖(2)、羅布麻根(3)外均在Rf值0.64、0.52處有翠綠色斑點。該方法重現性強,方法簡便,可用于該藥的定性鑒別。
3.2 高效液相色譜法測定槲皮素的含量,8月份采集的羅布麻葉為0.772%,9月份采集的羅布麻葉為0.954%,10月份采集的羅布麻葉為0.883%(圖10)。測定數據證實羅布麻葉中槲皮素的含量8月份<9月份>10月份。根據上述測定結果,羅布麻葉的采集期以九月份為宜。
3.3 羅布麻花含槲皮素為0.231%、羅布麻莖含槲皮素為0.021%、羅布麻地上部分含槲皮素為0.262%(圖11),均<中國藥典項下規定的含槲皮素不得少于0.60%的指標。為了充分利用藥物資源,建議制定羅布麻地上部分的質量標準,作為提取羅布麻浸膏的原料。